摘要：本试验采用完全随机区组设计，选用72只28日龄体重相近、健康的SD大鼠，按体重随机分为6个处理组。试验处理一至五分别添加肽生素制剂(商品名，主要成份为天蚕素抗菌肽，为添加剂类产品，以下同)的浓度为25、50、75、100和125mg/kg，处理六为空白对照组。每个处理设6个重复，每个重复2只鼠，试验期35天。大鼠在0-7d的日增重(ADG)、日采食量(ADFI)、饲料转化率(FCR)各组间没有差异，但是随着大鼠日龄的增加，在7-14d、0-14d及0-21d时，各组间ADFI存在显著差异，且处理三(75mg/kg肽生素制剂添加组)显著高于处理六空白对照组，其它各处理组也高于空白对照组。各处理组之间正常SD大鼠的胸腺、脾脏指数在检测时间点14d、21d、28d和35d处均无显著差异。在试验第28d、35d，各试验处理组TNF-α和IL-1β检测水平显著高于对照组(P < 0.05)，各处理组γ-IFN水平相对于对照组有升高的趋势(P > 0.05)。上述结果表明，肽生素能够在不影响生长性能的基础上促进SD大鼠血液细胞因子的表达，缓解免疫应激，进而提高机体的免疫力。　　关键词：天蚕素抗菌肽 SD大鼠 生长性能 免疫 细胞因子　　肽生素的主要成分天蚕素抗菌肽是一种枯草芽孢杆菌生长的代谢产物，枯草芽孢杆菌发酵上清液经过蛋白分离电泳分析发现蛋白 mark 3KD-5KD之间有一条含量较多的蛋白带，对该发酵上清液经超滤浓缩等工艺回收得到目的蛋白并对其进行氨基酸测序分析，得知是一种含有37个氨基酸的多肽命名为肽生素。通过生物发酵技术规模化生产得到该产品，该肽类分子具有独特的免疫促生长等营养作用，增强机体免疫因子活性，提高动物机体免疫能力，从而提高饲料的生物学效价。　　断奶仔鼠作为一种成熟的动物模型，可以为大型哺乳类动物研究提供科学参考，因此，本试验主要研究日粮中添加肽生素对断奶仔鼠生长性能及免疫功能的影响。　　1 材料与方法　　1.1 试验动物与试验设计　　本试验采用完全随机区组设计，选用72头28日龄体重相近、健康的SD大鼠，购于北京试验动物中心，按体重随机分为6个处理组，各组初始体重无显著差异。试验开始前先将仔鼠用空白组料预饲七天，观察正常后正式饲喂各处理料。试验处理一至五分别添加肽生素制剂的浓度为25、50、75、100和125mg/kg，处理六为空白对照组。每个处理设6个重复，每个重复2只鼠，试验期35天。试验第1、7、14、21d，分别在同一时间进行称重结料;然后随机抽取各处理每重复中的一只进行采血，Na2-EDTA抗凝采全血5mL，离心取血清进行血清中细胞因子的检测，以测定免疫指标;并屠宰取脾脏，胸腺等各组织迅速称重，液氮冷冻后冻存于-70℃冰箱中，以测定细胞因子IL-1β、TNF-α、和γ-IFN的浓度。剩余老鼠继续饲喂，分组饲喂鼠料如前。试验第28d和35d进行采血，屠宰取样，方法如前。　　1.2 试验日粮　　试验日粮由北京科澳协力饲料有限公司加工购置，肽生素由北京中农颖泰生物技术有限公司提供。　　1.3 试验地点与时间　　试验地点：中国农业大学动物科技学院鼠营养代谢室　　试验时间：2008年05月07日至2008年06月15日　　1.4 饲养管理　　鼠营养代谢室的室内温度由自动控温设备控制在23℃左右，保持通风，严格控制光照(12h光照，12h黑暗)。自由采食和饮水。免疫程序按照农业部饲料工业中心常规饲养管理程序进行。　　1.5 测定指标　　生长性能指标：0d、7d、14d、21d和28d称重并记录耗料量，计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和饲料利用率(FCR)。　　免疫性能指标： ;血清中三种主要的免疫细胞因子IL-1β、TNF-α、和γ-IFN的浓度采用美国BioSource的ELISA试剂盒进行检测。　　1.6 数据分析　　本试验数据的统计分析采用SAS 8.02统计软件，采用t检验进行差异显著性分析。　　2 结果与分析　　2.1 对SD大鼠生长性能的影响　　如表1所示，大鼠在0-7d的ADG、ADFI、FCR各组间没有差异，但是随着大鼠日龄的增加，在7-14d、0-14d以及0-21d时，各组间ADFI存在显著差异，且处理三(75 mg/kg肽生素制剂添加组)显著高于处理六空白对照组，其它各处理组也高于空白对照组，这说明添加肽生素在一定程度上促进了大鼠的采食量。此外，肽生素最佳的添加剂量为75 mg/kg。但是，对于ADG和FCR来说，各处理间差异不显著。　　2.2 对SD大鼠免疫功能的影响　　如表2所示，各处理组之间正常SD大鼠的胸腺、脾脏指数在检测时间点14d、21d、28d和35d处均无显著差异，即添加肽生素对于SD正常大鼠的免疫器官脏器指数均未产生显著性影响，但是各处理组的免疫器官指数相对于空白对照组有提高的趋势。从柱状图1的走势来看，随着大鼠日龄的增大，其免疫器官指数呈下降趋势。在试验第14d检测的处理四(100 mg/kg肽生素制剂添加组)和处理五(125 mg/kg肽生素制剂添加组)的脾脏和胸腺指数均高于空白对照组，说明在免疫器官水平上，肽生素的添加对断奶SD大鼠的免疫功能有提高作用。　　如表3所示，在试验第28d、35d，各试验处理组TNF-α和IL-1β的因子水平显著高于空白对照组(P < 0.01)，γ-IFN的浓度在各处理间没有显著性差异，但是相对于空白对照，γ-IFN在处理组中的水平有升高的趋势。且从各免疫因子全期的水平来看，处理三、四的因子水平最高，说明75 mg/kg和100 mg/kg的添加量可以使大鼠的免疫因子水平获得最大程度的提高。从表3中可以看出，添加肽生素的试验组的细胞免疫因子提高效果明显。机体内稳定平衡的免疫功能是正常生理功能的重要保证，细胞因子是体内免疫平衡的重要物质基础之一，而IL-1β、γ-IFN和TNF-α是三种具有重要免疫调节功能的细胞因子，是机体免疫网络中正面防御的主要成员。总体而言，肽生素对于细胞因子稳定和平衡具有较好地促进作用，能够提高动物机体的免疫机能。　　3. 结论　　3.1 肽生素能够提高SD大鼠的采食量, 对增重无不良影响;　　3.2 肽生素不对SD大鼠的免疫器官产生明显的影响作用;　　3.3 肽生素能够在不影响生长性能的基础上促进SD大鼠血液细胞因子的表达，缓解免疫应激，进而提高机体的免疫功能。　　图1 免疫器官脏器指数柱状图　　图1-1 胸腺指数柱状图　　图1-2 脾脏指数柱状图　　表1 生长性能数据统计firstrow: yes"> 项目处理一处理二处理三处理四处理五处理六SEMP值0-7d ADG16.4618.9517.9217.9521.0217.520.61570.3953ADFI39.7140.3641.9842.6042.1238.260.53960.1415FCR3.232.142.362.392.072.210.18000.49297-14dADG17.52 17.29 19.07 20.74 17.19 18.43 0.48340.2457 ADFI50.57 bc51.50 bc55.17 a 52.90 ab 52.14 abc 49.26 c 0.52290.0158* FCR2.89 3.00 2.90 2.71 3.04 2.70 0.05470.3558 0-14dADG16.9918.1218.6919.3419.1017.970.35230.4501ADFI45.14 bc45.93 abc48.81 a47.75ab47.13ab43.76c0.47130.0190*FCR2.742.542.612.502.502.440.04580.501114-21dADG14.64 14.24 15.76 13.80 14.62 13.24 0.33840.4048ADFI44.57 44.76 50.62 43.33 47.24 50.14 1.34830.5603FCR3.04 3.17 3.24 3.16 3.25 3.77 0.10730.50050-21dADG18.6119.5420.5219.2520.1019.450.31640.6188ADFI59.82b58.88b65.12a59.85b59.48b53.63 c0.77920.0003*lastrow: yes"> FCR3.293.053.183.112.982.760.06340.2436　　注：①同行数据肩标字母不同者表示差异显著(P < 0. 05)，字母相同者或未标者差异不显著(P > 0.05) ②14d称重、28d称重、ADG(平均日增重)、ADFI(平均日采食量)单位为g　　表2 免疫器官脏器指数数据统计时间指标处理一处理二处理三处理四处理五处理六SEMP值14d胸腺指数(g/kg)2.742.912.663.232.902.640.070.18脾脏指数(g/kg)2.812.812.713.713.293.250.140.2621d胸腺指数(g/kg)2.652.252.302.322.112.320.090.67脾脏指数(g/kg)2.142.483.132.702.492.610.110.1528d胸腺指数(g/kg)1.762.221.941.852.012.030.060.41脾脏指数(g/kg)2.422.572.132.372.602.450.080.6135d胸腺指数(g/kg)1.751.471.661.631.551.540.050.60脾脏指数(g/kg)2.042.252.012.092.212.390.060.50　　注: ①同行数据肩标字母不同者表示差异显著(P < 0.05)，字母相同者或未标者差异不显著(P > 0.05)　　表3 血清免疫因子数据统计ng/ml项目处理一处理二处理三处理四处理五处理六SEMP值28dIL-1β0.151bc0.170ab0.188a0.184a0.176a0.145c0.0040.003γ-IFN2.1212.2652.3712.3632.1311.5720.1390.602TNF-α1.052c1.141b1.219a1.234a1.172b0.960d0.017<0.00135dIL-1β0.181c0.198b0.212a0.212a0.205ab0.176c0.003<0.001γ-IFN2.1712.9313.1773.1972.9632.2530.1630.266TNF-α1.076c1.162b1.235a1.249a1.191b0.991d0.016<0.001　　注：①同行数据肩标字母不同者表示差异显著( P < 0.05 ) ,字母相同者或未标者差异不显著( P > 0.05 )