1 原理
样品经灰化除去有机物，水浴加热溶解，加入还原剂草酸液，将As5+还原为As3+，并加入掩蔽剂三乙醇胺，消除Mn2+对测砷的干扰，As3+与I5+在酸性条件下（pH=3）反应生成单质碘。利用单质碘与碱性鲁米诺混合时，能产生化学发光，并县其发光强度与As3+的浓度，在一定范围内成线性关系，与标准工作曲线比较测定。
2 试剂与仪器
本方法中所用试剂，除特殊说明外，均为分析纯，实验室用水为蒸馏水。
2.1 砷（Ⅲ）标准溶液 精确称取0.1320g在100℃干燥2h的As2O3（优级纯），加5mL20%氢氧化钠溶液，溶解后加1mol/L硫酸25mL，移入1000mL容量瓶中，加水定容，此时溶液每毫升相当于100μg砷。按GB13079-91配制砷标准工作溶液，此时溶液每毫升相当于1μg砷。
2.2 鲁米诺贮备液（1.0×10-2mol/L） 准确称取1.7720g鲁米诺，加入4g氢氧化钠，用水溶解后定容于1000mL容量瓶中，避光保存。
2.3 KIO3标准溶液（1.0×10-2mol/L） 精确称取21.4000gKIO3，蒸馏水溶解定容于1000mL容量瓶中。
2.4 常规试剂、仪器 20%氢氧化钠溶液、1.0mol/L稀硫酸、0.1mol/L稀硫酸、0.1mol/L氢氧化钠溶液、三乙醇胺、草酸、瓷坩埚等实验室常用仪器。
2.5 YHF-1型液相化学发光分析仪。
2.6 PHS-3C型酸度计。
3 分析方法及步骤
3.1 样品处理 准确称取5g（精确至0.0001g）样品于30mL瓷坩埚中，在电炉上加热炭化，然后移入550℃高温炉中灰化4h至无炭粒，取出冷却，加入1.0mol/L硫酸溶液5mL，在水溶中加热溶解后，过滤于100mL容量瓶中，用水定容得样品溶液备用。
3.2 样品分析液的配制 准确称取10mL样品液与10mL草酸溶液，充分混合均匀，加1mL1.0mol/L稀硫酸溶液，静置片刻后，将溶液移入50mL容量瓶中，定容作为样品贮备液。取10mL样品贮备液于50mL容量瓶中，加入0.5mL0.1mol/L的KIO3溶液、1mL三乙醇胺，用0.1mol/L稀硫酸或0.1mol/L的氢氧化钠调pH=3后，再加入pH=3的稀硫酸稀释至刻度线，作为分析液用于样品测定。
3.3 条件实验分析液配制 将一定量的砷（Ⅲ）标准溶液移入50mL容量瓶中，加入0.5mL0.1mol/L的KIO3溶液，用0.1mol/L的稀硫酸或0.1mol/L的氢氧化钠调pH=3后，再用pH=3的稀硫酸稀释至刻度线，摇匀，用于条件实验。
3.4 测定
3.4.1 打开仪器，调节负高压-300V，预热仪器0.5h后，预测数次确定适宜的工作参数。
移取2mL样品分析液注入发光仪试液的贮管，移取3mL鲁米诺贮备液注入反应池，平缓打开试液贮管活塞，将试液加入反应池中，此时记录仪上记录下反应的化学发光相对强度，待反应结束后，打开废液排放活塞，放出反应废液，用水洗净备用。
3.4.2 工作曲线绘制 通过实验，选择最佳条件绘制工作曲线。为了提高测定的准确度，工作曲线按一数量级范围分级绘制。以As3+浓度在1.0×10-6～10.0×10-6g/mL为例，分别向6个50mL容光焕发量瓶移取As3+浓度为1.0×10-4g/mL的标准溶液：1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL，然后用pH=3的稀硫酸稀释至刻度线，摇匀，按测定步骤测出它们的峰值，以As（Ⅲ）浓度（g/mL）为横坐标，发光强度（格）为纵坐标绘制工作曲线。
3.5 结果计算 根据记录仪上的发光曲线，测量其峰高，并在工作曲线上求得试样中砷的含量，进而求得样品中砷的含量。计算结果表示到0.01mg/kg。
4 结果与讨论
4.1 条件实验 当砷（Ⅲ）浓度1.0×10-7～10.0×10-5g/mL时，通过正交试验表明：实验最佳IO3-深度为1.0×10-3mol/L，鲁米诺浓度为1.0×10-2mol/L。
通过试验证实，在pH=3时，碘-鲁米诺发光强度最大，配制溶液在半小时内测定效果最佳。矿物质元素除Mn对测砷结果有干扰外，其他元素无干扰，本实验采用加入掩蔽剂三乙醇胺消除Mn2+对测砷（Ⅲ）的干扰。
4.2 线性关系 通过实验，选择最佳条件绘制工作曲线表明：As（Ⅲ）浓度在1.0×10-7～1.0×10-5g/mL范围内，发光强度与砷浓度呈良好的线性关系。
4.3 精密度试验 在砷（Ⅲ）浓度为1.0×10-6g/mL、KIO3浓度为1.0×10-3mol/L、负高压-600V、量程为10mV的条件下，连续测定10次，测定结果见表1。根据测定结果，相对标准偏差RSD=2.44%。
表1 精密度试验测定结果
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | |
| 发光强度(格) | 6.86 | 6.59 | 6.42 | 6.57 | 6.45 | 6.72 | 6.46 | 6.78 | 6.44 | 6.42 |
4.4 样品加收率试验 取不同的饲料样品5份，在负高压为-600V、量程为10mV条件下，测定样品分析液，结果见表2。
表2 饲料中砷含量分析结果
| 分析结果 | 回收试验 | |||
| 加入As量(mg/kg) | 测得As量(mg/kg) | 回收率（%） | ||
| 1 | 0.12 | 1.00 | 1.06 | 94.6 |
| 2 | 0.46 | 1.00 | 1.44 | 98.6 |
| 3 | 0.88 | 1.00 | 1.84 | 97.9 |
| 4 | 2.50 | 2.00 | 4.64 | 103.1 |
| 5 | 4.24 | 4.00 | 8.18 | 99.3 |
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