猪精液的稀释和降温是同时进行的,由于猪精液中含有损伤精子物质,要求采精后在5分钟内第1次稀释,同时要求减少和空气与其他器皿接触。稀释时要求精液和稀释液等温,最大不相差1℃。第1次稀释在35℃左右,以后每隔3~4分钟降低1℃,到室温后每4~5分钟分钟降低1℃,降到17℃存入控温冰箱。
稀释时用稀释泵最好,可定时缓慢地把稀释液加入精液中,如控制40~60分钟,可以一次完成。如手工稀释,要沿瓶(杯壁)缓慢加入,然后用灭菌的玻棒轻轻搅动。先以1:1稀释,间隔5~10分钟再加入总量的一半,间隔15分钟,可加入全量。特别在采用长期保存稀释剂时,防止一次一下子加入全量,稀释成10~15倍。由于环境的突变,会造成稀释打击而损伤精子。稀释后3~5分钟再检查一次活力,如活力没有变化,说明稀释液的操作很好。不过长期稀释液和KIEV稀释液稀释后,精子运动速度下降,这是正常现象。由于要降低代谢,保护外膜,就必须对精子运动加以抑制。在长期保存的稀释剂中,一般都要加入酶清除精子体内废物,解除氧自由基的攻击,并且加入锌离子等保护精子外膜结构的完整性的物质。此外,还加入溶解精液中细胞碎片等非离子物质(有机物),使精子避免毒素损害。加入抑菌物质如抗生素,是通过该地区危害母猪繁殖的主要菌类和菌株选择抑菌作用最强的抗生素。这不是永远不变的。有些稀释液的配方在研究之初加青霉素和链霉素,隔了20年后,就要根据情况选择其他抗生素了。