人工授精技术可分两类三种方法:第一类为液态精液人工授精技术,又可分为二种方法,①鲜精或1∶2~4低倍稀释精液人工授精技术,一只公羊一年可配母羊500~1000只以上,比用公羊本交提高10~20倍以上。用这种方法,将采出的精液不稀释或低倍稀释,立即给母羊输精,它适用于母羊季节性发情较明显,而且数量较多的地区。②精液1∶20~50,高倍稀释人工授精技术,一只公羊一年可配种母羊10000只以上,比本交提高200倍以上。如江苏省海门市,地处长江三角洲,交通便利,多年来,利用这一技术,全市只有一个改良站制作高倍稀释精液,每乡镇设立输精点,实行统一供精,一只公羊每年配种母羊10000~15000只,精期受胎率可达90%。液态精液如果组织得不好,或在山区及交通不便而母羊较少的地区,会出现精液用不完而浪费的现象。降低了精液的利用率。第二类为冷冻精液人工授精技术,可把公羊的精液常年冷冻贮存起来,在任何地方、时间都可使用。如制作颗粒冷冻精液,一只公羊一年所采出的精液可冷冻10000~20000粒颗粒,可配母羊2500~5000只。精液用多少可解冻多少,不会造成浪费。但受胎率较低,高者在50%以上,低的只有30%~40%,其成本高,效果较差。 现将具体操作技术分述如下: 一、采精前的准备 1.种公羊采精调教 一般说,公羊采精是较容易的事情,但有些波尔
山羊公羊,尤其是初次参加配种的公羊,就不太容易采出精液来,可采取以下措施: ①.同圈法:将不会爬跨的公羊和若干只发情母羊关在一起过几夜,或与母羊混群饲养几天后公羊便开始爬跨。 ②.诱导法:在其他公羊配种或采精时,让被调教公羊站在一旁观看,然后诱导它爬跨。 ③.按摩睾丸:在调教期每日定时按摩睾丸10~15分钟,或用冷水湿布擦睾丸,经几天后则会提高公羊性欲。 ④.药物刺激:对性欲差的公羊,隔日每只注射丙睾丸素1~2毫升,连注射3次后可使公羊爬跨。 ⑤.将发情母羊阴道沾液或尿液涂在公羊鼻端,也可刺激公羊性欲。 ⑥.用发情母羊做台羊。 ⑦.调整
饲料,改善饲养管理,这是根本措施,若气候炎热时,应进行夜牧。 2.器械洗涤和消毒 人工授精所用的器械在每次使用前必须消毒,使用后要立即洗涤。新的金属器械要先擦去油渍后洗涤。方法是:先用清水冲去残留的精液或灰尘,再用少量洗衣粉洗涤,然后用清水冲去残留的洗衣粉,最后用蒸馏水冲洗1~2次。 (1).玻璃器皿消毒:将洗净后的玻璃器皿倒扣在网篮内,让剩余水流出后,再放入烘箱,在115℃下消毒30分钟。可用消毒杯柜或碗柜消毒,价格便宜、省电。消毒后的器皿透明,无任何污渍,才能使用,否则要重新洗涤、消毒。 (2).开腔器、温度计、镊子、磁盘等消毒:洗净、干燥后,在使用前1.5小时,用75%液精棉球擦试消毒。 3.假阴道的按装、洗涤和消毒 先把假阴道内胎(光面向里)放在外壳里边,把长出的部分(两头相等)反转套在外壳上。固定好的内胎松紧适中、匀称、平正、不起皱折和扭转。装好以后,在洗衣粉水中,用刷子刷去粘在内胎外壳上的污物,再用清水冲去洗衣粉,最后用蒸馏水冲洗内胎1~2次,自然干燥。 在采精前1.5小时,用75%酒精棉球消毒内胎(先里后外)待用。 附:配制75%酒精,用购买的医用酒精,一般为95%浓度,取其79毫升,加蒸馏水21毫升即为75%浓度的酒精。 二、采精 1.选择发情好的健康母羊作台羊,后躯应擦干净,头部固定在采精架上(架子自制,离地发情通一个羊体高)。训练好的公羊,可不用发情母羊作台羊,还可用公羊作台羊、假台羊等都能采出精液来。 2.种公羊在采精前,用湿布将包皮周围擦干净。 3.假阴道的准备:将消毒过的,酒精完全挥发后的内胎,用生理盐水棉球或稀释液棉球从里到外的擦试,在假阴道一端扣上消毒过并用生理盐水或稀液冲洗后甩干的集精瓶(高温低于25℃时,集精瓶夹层内要注入30℃~35℃温水)。在外壳中部生水孔注入150毫升左右的50℃~55℃温水,拧上气卡塞,套上双连球打气,使假阴道的采精口形成三角形,并好气卡。最后把消毒好的温度计插入假阴道内测温,温度在39℃~42℃为宜、在假阴道内胎的前1/3,涂抹稀释液或生理盐水作润滑剂(可不用凡士林,经多年实践不用任何润滑剂,不影响公羊射精)。就可立即用于采精。 4.采精操作 采精员蹲在台羊右侧后方,右手握假阴道,气卡塞向下,靠在台羊臀部,假阴道和地面约呈35度角。当公羊爬跨、伸出阴茎时,左手轻托阴茎包皮,迅速地将阴茎导入假阴道内,公羊射精动作很快,发现抬头、挺腰、前冲,表示射精完毕,全过程只有几秒钟。随着公羊从台羊身上滑下时,将假阴道取下,立即使集精瓶的一端向下坚立,打开气卡活塞,放气卡取下集精瓶(不要让假阴道内水流入精液,外壳有水要擦干),送操作室检查。采精时,必须高度集中,动作敏捷、做到稳、准、快。 5.种公羊每天可采精1~2次,采3~5天,休息一天。必要时每天采3~4次。二次采精后,让公羊休息2小时后,再进行第三次采精。 三、精液品质检查 精液品质检查项目很多,这里只介绍几种常用的项目 ①.肉眼观察:正常精液为乳白色,无味或略带腥味。凡带有腐败味,出现红色、褐色、绿色的精液均不可用于输精。公山羊正常的射精量范围是0.5~2.0毫升,平均为1.0毫升。 ②.精子活率检查在载玻片上滴原精液或稀释后的精液1滴,加盖玻片,在38℃显微镜温度下(可按显微镜大小,自制保温箱,内装40瓦灯泡1只,既照明又保温)检查。精子运行方式:有直线前进运动,回旋运动和摆动三种。评定精子活率以直线前进运动精子百分率为依据,通常是用十级评分法。大约有80%的精子做直线前进运动的评为0.8,有60%精子做直线前进运动的为0.6,依次类推。山羊原精液活率一般可达0.8以上。但新引进的
波尔山羊第一年使用活率往往较差,原精活率只有0.6,第二年就提高了。 在检查(评定)精子活率时,要多看几个视野,并上下扭动显微镜细螺旋,观察上、中、下三层液层的精子运动情况,才能较精确的评出精子的活率。 ③.密度检查 估测法:在检查精子活率的同时进行精子密度的估测。在显微镜下根据精子稠密程度的不同。 将精子密度评为“密”、“中”、“稀”三级、“密”级为精子间空隙不足一个精子长度,“中”级为精子间有1~2个精子长度空隙,“稀”级为精子间空隙超过2个精子长度以上,“稀”级不可用于输精。 精小计数法:用血细胞计算板较精确的计算出每毫升精液中的精子数,在精液高倍稀释时,要以精子数和精子活率来计算出精液稀释倍数。计算方法是:用红细胞吸管、取原精液至0.5刻度处,再吸入3%的氯化钠溶液至101刻度处,将原精液稀释200倍。以母指及食指分别按吸管的两端摇均,然后弄去吸管前数滴,将吸管尖端放在计算板与盖玻片之间的空隙边缘,使吸管中的精液流入计算室(高0.1毫米),充满其中。计算板中央用刻线分成25个正方形大格,共由400个小方格组成,面积为1平方毫米。在200、400倍显微镜下数出五个大方格(四角各一个,再加中央一个大方格,共80个小方格)内的精小数。计算时以精子头部为准,位于大方格四边线条上的精子,只数相邻两边的精子,避免重复。数出四个大方格的精子总数后加7个。即为1毫升原精液的精子数。 每毫升山羊精液中含精子数为10~50亿,平均为30亿。精子计数可10~15天进行1次。有条件的地方可用密度仪器测定。 四、液态精液稀释配方与配制 1.精液低倍稀释的稀释液,在精液采出后,原精数量不够时,可作低倍稀释,密度仪器测定。满足需要,并在短时间内使用,稀释液配方可简单些。如生理盐水;奶类稀释液:用鲜牛、羊奶,水浴92℃~95℃消毒15分钟,冷却去奶皮后即可使用。凡用于高倍稀释精液的稀释液,都可作低倍稀释用。 2.精液高倍稀释的稀释液,不但是为了扩大精液量,而要延长精子的保存时间,配方很多,现介绍2个稀释液。 (1)葡萄糖3克,柠蒙酸钠1.4克,EDTA(乙二胺四乙酸二钠)0.4克,加蒸馏水至100毫升,溶解后水浴煮沸消毒20分钟,冷却后加青霉素10万单位,链霉素0.1克,若再加10~20毫升卵黄,可延长精子存活时间。 (2)葡萄糖5.2克、乳糖2.0克、柠檬酸钠0.3克,EDTA0.07克,三墓0.05克,蒸馏水100毫升,溶解后煮沸消毒20分钟,冷却后加庞庆大霉素1万单位,卵黄5毫升。 五、液态精液稀释 原精液活率在0.6以上万可用于稀释输精。 1.精液低倍稀释,原精液量够输精时,可不必再稀释,可以直接用原精直接输精。不够时按需要量作1∶2~4倍稀释,要把稀释液加温到30℃,再把它缓慢加到原精液中,摇匀后即可使用。 2.精液高倍稀释,要以精子数、输精剂量、每一剂量中含有1000万个前进运动精子数,结合下午最后输精时间的精子活率,来计算出精液稀释比例,在30℃下稀释(方法同前)。 六、分装、保存和运输 精液低倍稀释,就近输精,把它放在小瓶内,不需降温保存,短时间用毕。 1.分装保存 (1)小瓶中保存;把高倍稀释清液,按需要量(数个输精剂量装入小瓶,盖好盖,用蜡封口,包裹纱布,套上塑料袋,放在装有冰块的保温瓶(或保存箱)中保存,保存温度为0℃~5℃。 (2)塑料管中保存:作者等把精液以1∶40倍稀释,以0.5毫升为一个输精剂量,注入饮料塑料吸管内(剪成20厘米长,紫外线消毒),两端用塑料封口机封口,保存在自制的泡沫塑料的保存箱内(箱底放冻好的冰袋,再放泡沫塑料隔板,把精液管用纱布包好,放在隔板上面,固定好)盖上盖子,保存温度大多在4℃~7℃,最高到9℃。精液保存10小时内使用,这种方法,可不用输精器了,经济实用。 2.运输 不论那种包装,精液必须固定好,尽可能减轻振动。若用摩托车送精液,要把精液箱(或保温瓶)放在背包中,背在身上。若乘汽车送精液,最好把它抱在身上。 七、冷冻精液制作技术 制作冷冻精液,要有很多设备