赵建国，张明祥，袁身淑，韩吉臣

摘  要：考察了酵母菌和赖氨酸菌混种固态发酵酱醋渣原料的方法对饲料蛋白质量的影响。研究结果表明，这是制备优质蛋白饲料的有效途径，饲料蛋白质量高。发酵产物酵母数达129.02亿个/g（干基），粗蛋白44.36％，真蛋白34.60％，氨基酸总量30.01％，必需氨基酸配比平衡酸，赖氨酸的比例高达4.37g/（100g蛋白）。胱氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸和苏氨酸等必需氨基酸的比例也都高于FAO标准值。

关键词：酱醋渣；酵母菌；赖氨酸菌；混种固态发酵；酵母数；粗蛋白；真蛋白；必需氨基酸平衡

中图分类号：S816.4；S 816.6文献标识码：A文章编号：1003－6202（2002）07-0028-02

0  前言

    在固态发酵酵母蛋白饲料或缺乏鱼粉、豆饼的粮食饲料中，赖氨酸的含量较低。为了提高饲养效果和饲料蛋白的利用率，本文对酵母菌和赖氨酸菌混种固态发酵酱醋渣生产赖氨酸强化的蛋白饲料进行了探索性研究。其目的是提高发酵产物中蛋白质含量的同时，适当提高赖氨酸的含量，得到必需氨基酸平衡的高蛋白产品。

1  材料和方法

1.1  材料

1.1.1  原料

    （l）酱渣：由江苏徐州万通酿造有限公司提供。

    （2）醋渣：由江苏徐州万通酿造有限公司提供。

    （3）麸皮：外购。

1.1.2           菌种

   （l）北京棒杆菌Lys-02。

   （2）酵母Y9601。

1.1.3  培养基

    （1）赖氨酸菌斜面培养基：牛肉膏1.2％，蛋白陈1％，豆饼水解液 2％，葡萄糖0.5％（保藏培养基不加），NaCl0.5％，琼脂2％， pH 7.2，0．1Mpa灭菌15 min。

    （2）赖氨酸菌种子培养基：葡萄糖2.0％，（NH₄）₂SO₄0.4％，尿素0.l％，K₂HPO₄0.1％，玉米浆2％，豆饼水解槽2％，MgSO₄ 0.025％，pH 7.0，0.1 Mpa灭菌15 min。

    （3）酵母斜面培养基：麦汁5°Bé麦芽汁，琼脂2％，pH6.0，0.1Mpa灭菌15 min。

    （4）酵母种子培养基：麦汁5°Bé。K₂HPO₄O．10％，酵母膏0.10％，尿素0.10％，pH 6.0，0.1Mpa灭菌15min。

    （5）混种固态发酵优化培养基：酱渣50％，醋渣10％，麸皮物40％；以主辅基料100％为基准，加入糖蜜12％、玉米浆2％，豆饼水解液8％，硫酸铵2.5％，尿素1.25％，磷酸氢二钾0.10％，磷酸二氢钾0.10％，硫酸镁0.025％，1％石灰水16ml，基质初始含水量70％，自然 pH值，0.15 MPa灭菌30min。

1.2  方法

1.2.1  测定方法

    （1）酵母数的测定：血球计数法^［1］。

    （2）赖氨酸的测定：茚三酮比色法^［2］。

    （3）粗蛋白的测定：凯氏定氮法^［3］。

    （4）真蛋白的测定：三氯乙酸法^［4］。

    （5）氨基酸的测定：氨基酸自动分析法。

1.2.2  接种方式

经实验研究，Lys-02菌株固态发酵赖氨酸的周期为96h，而酵母Y9601单一菌种固态发酵富集酵母蛋白的发酵周期为48h。据此，采用两菌种混种固态发酵时首先接入10％的赖氨酸菌种子液，48h后接入15%的酵母种子液，总发酵时间为96h，这样既适合酵母和赖氨酸菌的发酵周期，又可减少酵母对糖蜜的竞争性利用，有利于赖氨酸的积累。

1.2.3           工艺流程（图1略）

图1  工艺流程图

2  结果与讨论

2.1          优化条件下酱醋渣混种固态发酵重复试验结果

在优化培养条件下进行5批次的混种固态发酵重复试验，结果见表1。产物酵母数平均值为129.02亿个/g（干基），产酸率平均值为1.06g/100g（干基）。